Dissertação/Tese DESENVOLVIMENTO IN VITRO, GERMINAÇÃO E CRIOPRESERVAÇÃO DE SEMENTES DE DROSERA spp. - PPGPV

Objetivou-se com esse trabalho estudar a influência da luz e da temperatura na germinação in vitro e ex vitro de sementes de Drosera latifolia, D. hirtella, D. montana e D. schwackei, caracterizando morfologicamente as sementes e plântulas, além de desenvolver um protocolo para germinação in vitro, desenvolvimento de plantas e criopreservação de sementes de D. schwackei. Na caracterização física avaliou-se o peso de mil sementes e o grau de umidade. Para a determinação das características morfológicas foram avaliadas a biometria das sementes e suas características externas. Os testes de germinação foram conduzidos in vitro e ex vitro, para cada espécie, por meio de testes com quatro temperaturas constantes (15ºC, 20ºC, 25ºC e 30ºC), bem como presença e ausência de luz. Concluiu-se que as quatro espécies são sensíveis à luz e os melhores resultados de germinação foram obtidos nas temperaturas de 20ºC e 25ºC. Na segunda etapa do trabalho, realizou-se um ensaio de desinfestação com as sementes de D. schwackei. Após esse processo, as sementes de D. schwackei foram inoculadas em diferentes concentrações do meio de cultura MS (1/3, 1/2 e 100%) para a análise de germinação. Uma parte das plântulas obtidas a partir do teste de germinação foi transferida para um novo meio de cultura, com diferentes concentrações do meio MS (1/3, 1/2 e 100%) para a indução do desenvolvimento. A outra parte das plântulas foi subcultivada em meio MS 1/3 dos sais, com diferentes concentrações de BAP (0,0; 0,5; 1,0 e 1,5 mg.L-1), visando verificar a capacidade de multiplicação do explante. Os melhores resultados para a germinação das sementes, desenvolvimento das plântulas e o cultivo in vitro de D. schwackei, foram obtidos utilizando-se o meio MS1/3 e MS1/2. Já as baixas concentrações de BAP favoreceram o crescimento das plantas in vitro, apesar destas não promoverem brotações. As plântulas obtidas dos experimentos in vitro foram aclimatizadas e o musgo Sphagnum foi o mais indicado. As sementes de D. schwackei foram armazenadas em criotubos e imersas em botijão contendo nitrogênio líquido e mantidas por 1, 6, 12, 24, 48, 120 horas. A criopreservação não interferiu no desenvolvimento e na morfologia das plantas em nenhum período de armazenamento.

The objective of this work was to study the influence of light and temperature on in vitro and ex vitro germination of seeds of Drosera latifolia, Drosera hirtella, Drosera montana and Drosera schwackei, to characterize seeds and seedlings morphologically, also to develop a protocol for germination in vitro, plant development and cryopreservation of D. schwackei seeds. In the physical characterization were evaluated, one thousand seed weight and moisture content. For the determination of the morphological characteristics the biometrics of the seeds, as well as their external characteristics, were evaluated. Germination tests were conducted in vitro and ex vitro for each species. Four constant temperatures (15ºC, 20ºC, 25ºC and 30ºC), presence and absence of light were tested. It was concluded that the four species are light sensitive and the best germination results were obtained at temperatures of 20ºC and 25ºC. In the second stage of the work, a disinfestation test with D. schwackei seeds was carried out. After disinfestation, D. schwackei seeds were inoculated in different concentrations of MS culture medium (1/3, 1/2 and 100%) for germination analysis. Part of the seedlings obtained from the germination test were transferred to a new culture medium, with different concentrations of the MS medium (1/3, 1/2 and 100%), to induce development. The other part of the seedlings were subcultured in MS medium 1/3 of the salts, with different BAP concentrations (0.0, 0.5, 1.0 and 1.5 mg.L-1), aiming to verify the multiplication capacity from explant. Best results for seed germination, seedling development and in vitro cultivation of D. schwackei were obtained using MS1/3 and MS1/2 medium. Low concentrations of BAP favored plant growth in vitro, although they did not promote sprouts. Seedlings obtained from in vitro experiments were acclimatized and Sphagnum moss was the most suitable. Drosera schwackei seeds were stored in cryotubes and immersed in a canister containing liquid nitrogen and kept for 1, 6, 12, 24, 48, 120 hours. Cryopreservation did not interfere with plant development and morphology in any storage period.